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细胞计数时滴多少

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2024-12-31 22:28:01

在细胞计数时,滴入细胞悬液的体积应根据具体实验要求和细胞悬液的浓度来确定。以下是一些常见的方法和步骤:

使用细胞计数板

根据待测菌悬液的浓度,加入无菌水进行适当稀释(通常稀释100倍)。

取洁净的血球计数板,在计数区上盖上一块盖玻片。

将菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴(不宜过多),让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上(不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高),然后加盖盖玻片(勿使产生气泡)。

计数时,若计数区是由16个中方格组成,按对角线方位,数左上、左下、右上、右下的4个中方格(即100小格)的菌数。

使用显微镜法

取10ul细胞悬液与10ul台盼兰混合均匀于1.5ml离心管中。

盖上盖玻片,取10ul混合液自血球计数盘上方加入,于10倍生物显微镜下观察,活细胞不染色,死细胞被染成蓝色。

分别计数四个大方格,得到细胞总数,再除以4,乘以稀释倍数(本实验为2),最后乘以10^4,即为每ml细胞悬液中细胞数。

建议

精确滴加:在细胞计数时,滴入的细胞悬液量应尽量精确,通常一小滴即可,避免因滴入过多而导致计数区溢出或气泡产生。

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