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分离胶应该灌多少

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2024-12-31 23:00:09

分离胶的灌装量主要根据实验需求、蛋白分子量大小以及实验条件来确定。以下是一些具体的建议:

一般配制量

1mm厚的玻璃板制胶,配制分离胶(下层胶)约5ml,缓缓注入玻板中,然后覆盖一水层,室温静置15~20分钟待胶凝固。

浓缩胶(上层胶)约2ml,最后插上1mm的梳子,室温静置20分钟。

血清分离胶使用量

使用加胶机将分离胶加入到试管中,加入量为0.8-1.2g每支试管。

分离胶的厚度要大于等于6mm,以确保血清和血块能够很好隔离。

根据蛋白分子量选择

蛋白分子量小的蛋白,通常胶浓度选大一些,反之亦然。

例如,对于分子量在10-250kDa之间的蛋白质,通常推荐使用10%-12%的分离胶。

对于分子量在5-100kDa之间的蛋白质,建议使用12%以上的分离胶。

预实验

如果实验之前无法准确判断胶浓度如何选择,可以先进行10%或12%的预实验,后续再根据实际情况优化实验条件。

建议

根据实验需求选择合适的分离胶浓度,以确保蛋白能够有效分离。

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