pcr mix加多少
在PCR反应中,Master Mix的添加量通常取决于实验的需求和扩增体系的大小。以下是一些常见的PCR Mix添加量指导:
一般PCR的Master Mix
通常是两倍浓缩液,只需加入模板和引物即可。
特定实验中的Master Mix
例如,100次转ESPES-NOs基因植物PCR Mix,其添加量应按照实验步骤和试剂盒说明进行精确配制。
引物和酶的稀释
扩增引物稀释为0.5 μM,如果进行X个Plex反应,则共需要2.21 * X ul的引物Mix。
样品量与Mix的配制
一个样品量(4ul)需要X个样品量,配制Mix时需要考虑额外的10-15%的量来补偿误差。
建议
精确配制:根据具体的实验需求和试剂盒说明,精确配制Master Mix,确保反应体系的准确性和可重复性。
避免反复冻融:Master Mix不应反复冻融,以免影响其性能,建议溶解后放在4度保存。
预冷:在冰上操作,以减少加样误差和提高反应效率。
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