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跑wb需要什么试剂

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2025-01-04 15:59:42

在Western Blot(WB)实验中,需要准备以下试剂:

样本裂解液(Lysis Buffer)

包含缓冲系统、盐离子、离液剂、还原剂和蛋白酶抑制剂。

常用的裂解液类型包括RIPA裂解液(RIPA buffer)。

电泳缓冲液

通常由Tris和甘氨酸组成,有时还会添加SDS等其他成分。

用于维持电泳过程中的离子强度和pH值。

转膜缓冲液

由Tris、甘氨酸和甲醇组成。

用于在电泳后转移蛋白质到膜上。

洗涤液

常用的洗涤液有PBS、TBS、生理盐水等,用于在裂解和转移过程中清洗样品。

上样缓冲液(Loading Buffer)

包含SDS、甘油、β-巯基乙醇和染料等成分。

SDS使蛋白质带上负电荷,甘油增加样品密度,β-巯基乙醇用于蛋白质变性,染料指示电泳进程。

封闭液/抗体稀释液

通常由脱脂牛奶和TBS组成,用于封闭膜上的非特异性结合位点,并稀释抗体。

酶抑制剂

根据实验需求选择合适的蛋白酶抑制剂,防止蛋白质在裂解过程中被降解。

其他辅助试剂

如浓盐酸、甲醇等,用于调整pH值或溶解某些试剂。

这些试剂的具体配方和使用方法可能会根据实验的具体需求和条件有所调整。建议根据实验的具体需求和条件选择合适的试剂,并严格按照试剂的使用说明进行操作,以确保实验的准确性和可重复性。

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